原代细胞

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1、取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3h，以稳定细胞状态；
2、细胞拍照，留存照片；
3、待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养；
4、收集T-25培养瓶中的培养基，保留，用PBS清洗细胞一次；
5、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，37℃温浴，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
6、用吸管轻轻吹打混匀，按1:2适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；7、待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

注意事项
1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月；
2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态；
4、怀信生物提供完全培养基，更有利于细胞生长；
5、该细胞只可用于科研。

备注：由于实验所用试剂与操作环境的不同，以上方法供各实验室参考。