一、服务简介
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代性作用。
原代细胞是来源于不同组织器官,胚胎及血液的新鲜样本经特殊实验方法处理而制备的原初培养细胞,这一过程被称为原代细胞分离。原代细胞具有保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。
细胞的分离纯化和细胞培养技术是细胞生物学实验的基础。我们通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞。原代细胞培养是指将组织从动物体内取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法剪碎处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖的过程。
二、技术流程
酶消化分离法(过夜冷消化法)
①细胞间质较少的软组织,如肝、肾、甲状腺、羊膜、胚胎组织、上皮组织等,用Hanks液清洗组织三次,剪成碎块大小为4毫米左右。②再用Hanks液洗2-3次以除去血球和脂肪组织。③加入0.25%的胰蛋白酶,摇匀后放4℃过夜。④次日再用Hanks液洗涤,弃去上清,共洗2-3次。⑤加入少量含血清的培养基吹打分散,细胞计数,按适当的浓度分瓶培养
非酶消化法(EDTA消化法)①把组织块剪碎,呈1mm3大小的组织块。②将碎组织块在平皿中用无钙镁PBS洗2-3次。③加入消化液(胰蛋白酶或胶原酶或EDTA)于37℃水浴中作用适当时间(中间可轻摇1~2次),若组织块膨松呈絮状可终止,若变化不大可更换一次消化液,继续消化直至膨松絮状为止。④弃去上清,加入含有钙、镁离子的培养基中止消化反应,并洗涤2-3次后,加入完全培养基。⑤用吸管吹打,使细胞充分散开后用纱网过滤后分瓶培养。
三、服务说明
1、明确告知所需种属的某个部位细胞;
2、所需细胞量;
3、纯度的要求;
4、若另有疑问欢迎向本公司咨询,我们将竭诚为您服务。
四、成果展示
五、询价及订购
感谢您选择我公司的原代细胞分离提取服务。如有相关问题请联系我们的工作人员。