一、服务简介
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。
二、技术流程
1、TUNEL-荧光显色:
基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上荧光素 (如FITC) 标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而通过荧光显微镜或流式细胞仪进行凋亡检测。
2、 TUNEL-DAB显色:
基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞 。
三、服务说明 1、待测组织样本石蜡切片,常温运输;冰冻切片,干冰运输;如需我司切片,则石蜡切片及冰冻切片需分别提供多聚甲醛固定的样本4℃冰袋运输或新鲜样本干冰运输。
2、准备待测样品制备组织切片或细胞爬片,并根据所选显色检测方法进行TUNEL检测凋亡
3、显色结果拍片,分析并整理结果报告。
4. 实验周期:1-2周;
5. 若另有疑问欢迎向本公司咨询,我们将竭诚为您服务。
四、成果展示
五、询价及订购
感谢您选择我公司的Tunnel检测细胞凋亡服务。如有相关问题请联系我们的工作人员。