一、服务简介
单个细胞在体外增殖六代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0 mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。实验方法包括平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验。
二、技术流程
平板克隆形成实验:适用于贴壁生长的细胞
1、取对数生长期的各组细胞,制备细胞悬液;
2、将细胞悬液作梯度倍数稀释,分别接种含培养液的皿中,培养2-3周;
3、经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养;
4、弃去上清液,4%多聚甲醛固定,GIMSA染色液染10-30 min;
5、计算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)× 100%;
6、结果统计分析
软琼脂克隆形成实验:适用于非锚着依赖性生长的细胞。
1、制备细胞悬液,梯度倍数稀释;
2、分别制备1.2%和0.7%琼脂糖溶液;
3、下层琼脂凝固后放入37℃培养箱备用;
4、加入细胞悬液,待上层琼脂凝固后,培养10-14天;
5、计算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)× 100%;
6、结果统计分析
三、服务说明 1、检测细胞株(若实验室有,可免费提供)。
2、待测毒性药物(根据实验方案有无)。
3、实验设计方案或参考文献。
4. 若另有疑问欢迎向本公司咨询,我们将竭诚为您服务。
四、成果展示
五、询价及订购
感谢您选择我公司的细胞克隆形成服务。如有相关问题请联系我们的工作人员。