一、服务简介
JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在,分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1 浓度低或膜电位水平低时,主要以单体形式存在,激发波长为527nm,呈绿色荧光;当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时,形成聚合物,发出红色的荧光,激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光,根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)是一种以JC-1 为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测。
二、技术流程
1、细胞重悬于0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。;
2、用适当的方法诱导细胞凋亡,同时设立阴性依照组合阳性对照组,收集细
胞;
3、用PBS洗涤细胞三次,收集不多于1×106的细胞;
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20
分钟。
5、在孵育期间,按照每1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入4mL 蒸馏水
的比例配制适量JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
6、37℃孵育结束后,600g 4℃离心3~4 min,沉淀细胞弃上清,注意尽量不
要吸除细胞。
7、用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤2 次:加入1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重
悬细胞,600g 4℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入1mL JC-1 染
色缓冲液(1×)重悬细胞,600g4℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
再用适量JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用流式细胞仪分析。
三、服务说明
1、检测细胞株(若实验室有,可共享)。
2、待测毒性药物(根据实验方案有无)。
3、实验设计方案或参考文献。
4、flowjo原文件
四、成果展示
五、询价及订购
感谢您选择我公司的JC-1细胞线粒体膜电位检测服务。如有相关问题请联系我们的工作人员。