服务简介
慢病毒( Lentiviruses)属于逆转录病毒科。慢病毒核蛋白质前整合复合物具有噬核特性,病毒基因组运输至细胞核,从而使慢病毒可以感染和在非有丝分裂细胞中复制。这一特性使得慢病毒成为基因治疗的常用转移载体,慢病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,病毒基因组整合于宿主基因组,可长时间、稳定表达外源基因。
慢病毒载体(Lentiviral vector)较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达siRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达siRNA/miRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性
技术流程
1、含目的基因的慢病毒载体的构建和纯化提取;
2、慢病毒表达载体PLVX,骨架质粒PLD2、PLD3,在脂质体LP2000作用下,三质粒共转染293T细胞;
3、培养48~72h,收集培养上清;
4、病毒的纯化和浓缩(超离和/或超滤);
5、滴度测定、目的基因检定;
6、将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,并检测靶基因的表达
服务说明
1、所要表达的外源基因名称或序列和所要选择的穿梭载体
2、提供重组后的慢病毒载体质粒
3、附上重组成功的酶切鉴定结果及对目的基因的PCR鉴定结果。
成果展示
询价及订购
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