一、服务简介
CRISPR(clustered,regularly interspaced,short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫机制。在细菌及古细菌中，CRISPR系统共分成3类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白（Cas蛋白）共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可，这为其能够广泛应用提供了便利条件。目前，来自Streptococcus pyogenes的CRISPR/Cas9系统应用较为广泛。
Cas9蛋白（含有两个核酸酶结构域，可以分别切割DNA两条单链）。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，形成RNA-DNA复合结构，进而对目的DNA双链进行切割，使DNA双链断裂。由于PAM序列结构简单（5’-NGG-3’），几乎可以在所有的基因中都能找到大量靶点，因此得到广泛的应用。CRISPR/Cas9技术已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞，是目前较高效的基因组编辑技术。
二、技术流程
1、针对敲除目的基因设计合适靶点；
2、构建 cas9-gRNA表达质粒并测序验证；
3、目的细胞培养，并将构建好的表达质粒转染细胞；
4、抗性筛选获得单克隆细胞；
5、基因敲除细胞系的检测
三、服务说明
1、细胞株必须是单核贴壁细胞，可以稳定传代；
2、敲除目的基因后，细胞不至死；
3、此活动针对的是定制单基因敲除细胞系。
四、 询价及订购
感谢您选择我公司的Crispr/Cas9服务。如有相关问题请联系我们的工作人员。